羊肚菌菌種制作

母種的制作
 
　　1、培養(yǎng)基配方
 
　　①、黃豆芽500克（煮汁），白糖20克，瓊脂20克，羊肚菌基腳～50克，水1升。
 
　?、?、黃豆芽500克（煮汁），白糖20克，瓊脂20克，水1升。
 
　　③、櫟木屑500克（煮汁），白糖20克，瓊脂20克，水1升。
 
　?、?、馬鈴薯200克（煮汁），白糖20克，瓊脂20克，蛋白胨0.5克，牛肉膏0.5克，水1升。
 
　?、?、蛋白胨1克，葡萄糖20克，瓊脂20克，酵母膏1克，磷酸二氫鉀1克，硫酸鎂1克，維生素B1，1克，水1升。pH值自然。
 
　　上述配方任選一組。將木屑或豆芽加水1升煮30分鐘，過(guò)濾取汁，并將余下的水補(bǔ)足1升，加入其它原料，煮至溶化后，按母種制作常規(guī)方法，分裝于18毫米 ×180毫米或20毫米×200毫米試管的1/5，塞上棉塞，使用高壓滅菌鍋徹底滅菌；在0.68千克壓力下維持60分鐘，自然冷卻至指針回到原位才可打 開，放成斜面?zhèn)溆谩?br data-filtered="filtered" /> 
　　2、菌種分離
 
　　首先要具有食用菌專業(yè)基礎(chǔ)知識(shí)、多年的菌種分離經(jīng)驗(yàn)及菌絲鑒別能力，其次要購(gòu)置母種培養(yǎng)基、無(wú)菌接種箱、恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、高倍顯微鏡等必要設(shè)備。根據(jù)當(dāng)?shù)匮蚨蔷L(zhǎng)季節(jié)，趁羊肚菌生長(zhǎng)旺盛時(shí)做菌種分離工作。
 
　?、?、分離方法
 
　　羊肚菌的分離方法與其它食用菌大不相同。它需要一種助生菌與羊肚菌菌絲共生時(shí)才能出菇。這種助生菌長(zhǎng)期活動(dòng)在土壤中，有時(shí)以芽孢菌形式出現(xiàn)，有時(shí)以菌絲形 式出現(xiàn)。它為羊肚菌的原基形成和子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育起著至關(guān)重要的作用。因此，從土壤中分離該菌比其它任何方式分離要好些。但從土壤分離難度太大，成功率不到 萬(wàn)分之一，并且難以分辨，所以只有采取羊肚菌基腳土分離，才能真正找到羊肚菌的出菇菌絲。初學(xué)者可在四川綿陽(yáng)市食用菌研究所購(gòu)買培養(yǎng)好的羊肚菌優(yōu)良母種， 并參加現(xiàn)場(chǎng)培訓(xùn)。
 
　　②、操作過(guò)程
 
　　在羊肚菌生長(zhǎng)的周圍，可見白色菌絲充滿土壤。從土壤中挑選這種菌絲容易成功?，F(xiàn)介紹兩種土壤分離的簡(jiǎn)易方法：一種是土壤直接分離，另一種是浸提分離。土壤 直接分離法：在羊肚菌生長(zhǎng)的地方去掉羊肚菌，取周圍5厘米以內(nèi)的土壤，去掉表層，把土壤放入無(wú)菌接種箱內(nèi)，然后放入試管培養(yǎng)基，進(jìn)行接種箱空間消毒。即按 接種箱每立方米空間用甲醛10毫升，高錳酸鉀5克，混合產(chǎn)生氣體消毒，半小時(shí)后才可操作。將基腳土用接種針挑取黃豆大小一塊，迅速放到試管內(nèi)的空白培養(yǎng)基 上，每管放一塊，塞上棉塞，接種后取出培養(yǎng)。浸提分離法：將基腳土用無(wú)菌水稀釋，澄清后用接種針蘸取少量溶液，滴到試管內(nèi)的空白培養(yǎng)基上，塞上棉塞后取出 培養(yǎng)。
分離后，放在12～18℃溫度下培養(yǎng)觀察。3天后培養(yǎng)基上萌發(fā)菌絲，每天仔細(xì)檢查每支試管的發(fā)菌及變化情況。區(qū)分和認(rèn)識(shí)各類雜菌是最關(guān)鍵的核心技術(shù)。真正 的羊肚菌菌絲最初為灰白色，生長(zhǎng)很快，時(shí)間長(zhǎng)會(huì)變成棕黃色，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)菌核，母種7天長(zhǎng)滿試管，原種、栽培種15天可長(zhǎng)滿瓶底。是否分離成功，必須做栽培 出菇試驗(yàn)，待出菇后才能準(zhǔn)確認(rèn)定是否羊肚菌的菌種。一旦菌種分離成功，在以后的轉(zhuǎn)接過(guò)程中要小心，不能再讓雜菌感染，必須把好高溫滅菌關(guān)和接種消毒關(guān)，才 能保證菌種質(zhì)量和成活率。
 
　　3、轉(zhuǎn)接提純
 
　　待培養(yǎng)基表面余水干后才能使用，否則會(huì)被細(xì)菌感染。接種要求在接種箱內(nèi)通過(guò)藥物滅菌進(jìn)行，將第一代純母種挑取黃豆大一塊帶菌絲的培養(yǎng)基，放入空白培養(yǎng)基上，每支母種可接10～15支，母種只能擴(kuò)種一次，不能多接或多擴(kuò)，否則會(huì)影響子實(shí)體生長(zhǎng)。
 
　　4、培養(yǎng)
 
　　接種后放在18～22℃溫度下避光培養(yǎng)，2～3天菌絲萌發(fā)，7天可長(zhǎng)滿斜面培養(yǎng)基。如不使用則放入冰箱在0～3℃溫度下保存，時(shí)間最長(zhǎng)不超過(guò)半年。
 
　　原種制作
 
　　1、培養(yǎng)基配方
 
　?、?、櫟木屑50%，棉籽殼30%，麥麩 15%，白糖1%，石膏1%，過(guò)磷酸鈣1%，土2%，pH值自然。
 
　?、?、櫟木屑75%，米糠或麥麩20%，白糖1%，石膏1%，過(guò)磷酸鈣1%，土2%，pH值自然。
 
　　③、稻草粉70%，麥麩25%，石膏1.5%，過(guò)磷酸鈣1.5%，土2%，pH值自然。
 
　?、堋⒚拮褮?0%，木屑8%，土2%，pH值自然。
 
　?、荨⒂衩仔?0%，木屑30%，米糠15%，石膏1%，過(guò)磷酸鈣1%，土3%，pH值自然。
 
　　2、操作過(guò)程
 
　　按配方將原料混合均勻，加入清水，使含水量達(dá)65%時(shí)裝瓶。裝瓶要求松緊一致，裝至瓶肩，將表面壓平，洗去瓶壁內(nèi)外沾染的培養(yǎng)基，塞上棉塞，或用塑料薄膜封口。
 
　　3、滅菌
 
　　高壓滅菌在0.68千克壓力下維持1小時(shí)，常壓滅菌在100℃溫度下保持6～8小時(shí)。滅菌時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)或壓力過(guò)高，否則會(huì)破壞其中養(yǎng)分。
 
　　4、接種與培養(yǎng)
 
　　接種在接種箱內(nèi)經(jīng)消毒后，每支母種可接種原種5～10瓶。接種后放在18～22℃溫度下避光培養(yǎng)，3天菌絲萌發(fā)吃料，10天菌絲布滿培養(yǎng)基表 面，15～20天菌絲長(zhǎng)滿瓶底。培養(yǎng)期間盡量避免強(qiáng)光刺激，菌齡以不超過(guò)50天為好。菌絲壽命與溫度有關(guān)，超過(guò)30℃以上幾小時(shí)就死亡。
 
　　栽培種制作
 
　　1、培養(yǎng)基配方
 
　　①、櫟木屑75%，米糠或麥麩20%，白糖1%，石膏1%，過(guò)磷酸鈣1%，土2%，pH值自然。
②、棉籽殼75%，麥麩20%，石膏1%，過(guò)磷酸鈣1%，土3%，pH值自然。
 
　?、邸⒌静莘?5%，麥麩15%，過(guò)磷酸鈣2%，土3%，pH值自然。
 
　?、?、玉米芯80%，米糠15%，石膏2%，過(guò)磷酸鈣1%，土2%，pH值自然。
 
　　⑤、農(nóng)作物藤稈粉75%，米糠10%，麥麩10%，白糖1%，石膏1%，過(guò)磷酸鈣1%，土2%，pH值自然。
 
　　2、操作過(guò)程
 
　　按配方將原料混勻后，加水調(diào)至含水量為65%，裝瓶，滅菌接種，培養(yǎng)。操作方法同上述原種。經(jīng)1個(gè)月菌絲長(zhǎng)滿瓶后就可用于生產(chǎn)栽培。